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西尼罗病毒PCR检测试剂盒组成及试剂配制

浏览次数:33发布日期:2020-10-08

西尼罗病毒PCR检测试剂盒组成及试剂配制:

1、酶标板:一块(96孔)

2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。

3、 样品稀释液:1×20ml。

4、 检测稀释液A:1×10ml。

5、 检测稀释液B:1×10ml。   

要注意的是,如果将试剂盒刚从冰箱里面拿出来就立即使用的话,可能会影响,其直接的后果是对一些弱阳性标本的检测出现假阴性。建议:先从冰箱中拿出来,在室温下放置20分钟以上后,再进行测定,以使试剂盒在ELISA检测试剂盒使用前与室温平衡。这样做的目的,主要是为了在后面的温育反应步骤中,能使反应微孔内的温度能较快地达到所要求的高度,以满足测定要求。
    

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