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PCR试剂盒的注意事项,使用方法及用途

浏览次数:82发布日期:2021-03-02
   PCR试剂盒使用注意事项:
  注意事项一:保存;未拆封的试剂盒,请于-20℃保存;拆封之后,应在4℃保存,在试剂消耗量较少的实验室,可以考虑将试剂盒的按照组分单独分装,后保存在-20℃。
  注意事项二:配置;试剂盒内所含各组份都是混合物,在静置情况下会发生分层现象,因此,试剂盒现配现用,震荡混匀,避免反复冻融,避免预混。其中,反复冻融将大幅缩短试剂盒使用寿命。在扩增体系的选择时,尽量选择标准体系,再根据检材情况加入模板,之后切勿忘记以PCR用水补足扩增体系。
  注意事项三:切勿预混;因PCR试剂盒中酶的活性较高,将各组份按照比例混合之后,即使没有达到它的适合温度,但也可能发生与引物结合,导致实验结果出现丢位点或者杂合子纯化等情况。
  PCR试剂盒的方法和用途:
  1.支原体常规PCR检测试剂盒(一步法)
  1)适合科研单位检测,或单位内检,用PCR法检测细胞或其他生物基质。
  2) 比药典操作标准合并了一步,(将内控对照试剂预先混合在PCR mix试剂中),操作更简洁。
  3)样本量为2μl,灵敏度为20个基因组拷贝/反应。结果准确。
  2.支原体常规PCR检测试剂盒(经典法,不含Taq酶)
  1) 符合欧洲药典、中国药典要求,更适合细胞治疗,CAR-T,抗体药、疫苗等临床项目申报和质检。
  2)样本需先做DNA抽提。抽提后样本加入量为10μl。
  3)试剂盒中不含Taq酶,需另外购买。
  4) 厂家可协助完善方法验证步骤。
 
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