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异源曼氏杆菌PCR检测试剂盒试剂准备方法

浏览次数:94发布日期:2021-03-23

异源曼氏杆菌PCR检测试剂盒试剂准备方法:

1. DNA模板

2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)

3.10×PCR Buffer

4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5.Taq酶操作步骤 

1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。

      10×PCR buffer             5μl

      dNTP mixl                 4μl

       引物1(10pM)               2μl

       引物2(10PM)              2μl

       Taq酶(2U/μl)            1μl

      DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl

      加ddH2O至               50 μl

    视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。

2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,后在72℃ 保温7min。

3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。

4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。

小鼠血管生成素样蛋白4(ANGPTL4)elisa检测试剂盒
小鼠血管生成素4(ANG-4)elisa检测试剂盒
小鼠血管生成素2(ANG-2)elisa检测试剂盒
小鼠血管生成素1(ANG-1)elisa检测试剂盒
小鼠血管生长素(ANG)elisa检测试剂盒
小鼠血管内皮细胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)elisa检测试剂盒
小鼠血管内皮细胞生长因子受体-3(VEGFR-3/Flt-4)elisa检测试剂盒
小鼠血管内皮细胞生长因子受体2(VEGFR-2/Flk-1)elisa检测试剂盒
小鼠血管内皮细胞生长因子受体1(VEGFR-1/Flt1)elisa检测试剂盒
小鼠血管内皮细胞生长因子D(VEGF-D)elisa检测试剂盒
小鼠血管内皮细胞生长因子C(VEGF-C)elisa检测试剂盒
小鼠血管内皮细胞生长因子B(VEGF-B)elisa检测试剂盒
小鼠血管内皮细胞生长因子(VEGF)elisa检测试剂盒
小鼠血管紧张素转化酶2(ACE2)elisa检测试剂盒
小鼠血管紧张素转化酶(ACE)elisa检测试剂盒
小鼠血管紧张素原(aGT)elisa检测试剂盒
小鼠血管紧张素Ⅱ(ANG-Ⅱ)elisa检测试剂盒
小鼠血管紧张素Ⅰ(Ang-Ⅰ)elisa检测试剂盒
小鼠血管紧张素1-7(Ang1-7)elisa检测试剂盒
小鼠血管活性肠肽(VIP)elisa检测试剂盒

 

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