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大鼠elisa试剂盒使用期间注意事项

浏览次数:63发布日期:2021-07-20
  大鼠elisa试剂盒采用基于双抗体夹心法的酶联免疫吸附检测技术。将抗大鼠IL-4单克隆抗体包被在酶标板上;分别加入梯度稀释的标准品和预稀释的样本,标准品和样本中的大鼠IL-4会与酶标板上的包被抗体充分结合;洗板后加入生物素化抗大鼠IL-4抗体,该抗体会与板子上包被抗体捕获的标准品和样本中的大鼠IL-4发生特异性结合;洗板后加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的链霉亲和素,生物素与链霉亲和素会发生高强度的非共价结合;洗板后加入显色剂底物TMB,若反应孔中样品存在不同浓度的大鼠IL-4,则HRP会使无色TMB变成不同深浅(正相关)的蓝色物质,加入终止液后反应孔会变成黄色;在2max=450nm(OD=450nm)处测定反应孔样品吸光度(OD),样本中的大鼠IL-4浓度与OD成正比,通过绘制标准曲线和四参数拟合软件便可计算出样本中大鼠IL-4的浓度。
  大鼠elisa试剂盒注意事项:
  1.试剂盒应在有效期内使用,请不要使用过期的试剂。
  2.试剂盒未使用时应保存在2-8℃冰箱,已复溶但未用完的标准品,请丢弃。
  3.试剂盒使用前请在室温恢复30min,且充分混匀试剂盒里的各种成份及制备的样品。
  4.在试验中标准品和样本建议作复孔检测,且加入试剂的顺序应保持一致。
  5.为避免交叉污染,请在试验中使用1次性试管,枪头,封板膜及洁净塑料容器。
  6.浓缩生物素化抗体和浓缩酶结合物的体积较少,在运输过程中微量液体会沾到管壁及瓶盖上,使用前请离心处理(5-10S即可),使管壁上的液体集中在管底部,取用时,请用移液器小心吹打几次。
  7.除了试剂盒中的浓缩洗涤液和终止液可以通用外,请不要使用其他来源试剂盒内含的试剂代替本试剂盒中的某单个组分。
  8.为保证结果准确,每次检测均需做标准曲线。
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