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人神经降压素(NT)免疫组化试剂盒​操作步骤

浏览次数:590发布日期:2021-11-11

神经降压素(NT)免疫组化试剂盒操作步骤:


1. 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在di一、第二孔中分别加标准品100μl,然后在di一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从di一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。

2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4. 配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。

5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。

7. 温育:操作同3。

8. 洗涤:操作同5。

9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.

10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟。

ARPC2肌动蛋白相关蛋白2/3亚型2抗体

ARPC4肌动蛋白相关蛋白2/3亚型4抗体

ARSI芳香基硫酸酯酶家族蛋白1抗体

ART1肿瘤抑制相关蛋白PHEMX抗体

ARVCF精神分裂症与犰狳重复基因抗体

ALDH1乙醛脱氢酶1型抗体

phospho-Acetyl Coenzyme A Carboxylase alpha (Ser80)磷酸化乙酰辅酶A羧化酶抗体

phospho-Acetyl Coenzyme A Carboxylase alpha (Ser1263)磷酸化乙酰辅酶A羧化酶抗体

phospho-ABCA1 (Ser2054)磷酸化腺苷三磷酸结合盒转运体A1抗体

phospho-Aconitase 1 (Ser138)磷酸化铁调节蛋白1抗体

phospho-Aconitase 1 (Ser711)磷酸化铁调节蛋白1抗体

phospho-Acetyl Coenzyme A Carboxylase beta (Ser220)磷酸化乙酰辅酶A羧化酶抗体

Annexin VI膜粘连蛋白6抗体

ANKRD42锚蛋白重复结构域蛋白42抗体

Anillin胞环蛋白肌动蛋白结合蛋白抗体

Adenovirus 5 E1A binding protein腺病毒5结合蛋白BS69抗体(骨形态发生蛋白受体相关分子1)

APOA1载脂蛋白A1抗体

ATG16L自噬相关蛋白16A抗体

phospho-ATG4D(Ser15)磷酸化自噬相关蛋白4D抗体

Phospho-ATG4C(Ser451)磷酸化自噬相关蛋白4C抗体

phospho-ATG7(Ser95)磷酸化自噬相关蛋白7抗体

phospho-ATG16A(Ser287)磷酸化自噬相关蛋白16A抗体


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