定量PCR检测试剂盒使用时应注意以下方面

　　定量PCR检测试剂盒的适用范围广，包含一系列生物样品，如血液、动物、植物、真菌、酵母、细菌和病毒等，简化实验步骤，减少大量的核酸纯化试剂的消耗，问研究人员节约大量的时间和科研费用。对于商检、CDS、疾病诊断的用户，还可以在很大程度上降低污染，包含操作人员的安全。

　　定量PCR检测试剂盒使用时应注意以下方面：

　　1.保存

　　未拆封的试剂盒，请于-20℃保存；拆封之后，应在4℃保存。在试剂消耗量较少的实验室，可以考虑将试剂盒的按照组分单独分装，后保存在-20℃。

　　2.配置

　　PCR试剂盒内所含各组份都是混合物，在静置情况下会发生分层现象，因此试剂盒现配现用，震荡混匀，避免反复冻融，避免预混。其中，反复冻融将大幅缩短试剂盒使用寿命。

　　在扩增体系的选择时，尽量选择标准体系，再根据检材情况加入模板，之后切勿忘记以PCR用水补足扩增体系。

　　3.切勿预混

　　因试剂盒中酶的活性较高，将各组份按照比例混合之后，即使没有达到它的适温度，但也可能发生与引物结合，导致实验结果出现丢位点或者杂合子纯化等情况。

　　4.阴阳性参照

　　实验结果会受提取、扩增和电泳等多个环节的影响，因此，每次扩增实验都应该添加一组阴阳性参照。这样，当结果异常的时，我们就可以结合阴阳性参照的表现，排查问题出在哪个环节。

　　5.阳性参照是否通用

　　虽然多数试剂盒的阳性参照都是007，但是案件试剂盒和建库试剂盒的阳性参照浓度不同，通常来说案件试剂盒的浓度更低，扩增时需选用试剂盒相对应的阳性参照。