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如何看待PCR试剂盒的“更新换代”?

浏览次数:86发布日期:2020-10-23
   自PCR试剂盒技术作为临床诊断方法以来,实验室污染一直是影响检测质量的罪魁祸首。虽经多次技术改进和换代,实验室污染就像冬季的雾霾很难彻底去除,如果不进行严格的污染监控,几乎所有的核酸提取仪器都会沦陷。
  PCR技术的更新换代,似乎都遵循了这样一个规律,那就是新一代试剂盒或多或少会解决上一代技术存在的问题,如检测敏感性逐渐得到提升、检测步骤逐渐得到简化、实验室污染逐渐得到控制。
  一代试剂盒采用电泳法进行结果鉴定,那时实验室人员对污染还没有清楚的认识,当从“饮水中”也扩增出“结核杆菌”时,才意识到问题的严重性,于是暂停PCR技术在临床诊断中的应用。人们把污染的症结归为“电泳”二字,随后出现了“ELISA-PCR”或杂交梳等核酸检测方法,由于同样是产物开放性鉴定,并没有改变污染成灾的事实,反而使人们对PCR技术能否用于临床诊断产生质疑。
  二代荧光PCR技术的产生,由之前的开放性核酸鉴定方法,变成由荧光染料或Taq MAN探针为信号源的闭管鉴定,避免了扩增产物外泄的实时荧光PCR技术,事实证明实验室污染并没有得到完全控制,一些研究人员认为煮沸得来的核酸干扰物质太多,是影响检测敏感性的主要原因。
  三代试剂盒“微量核酸释放剂”法操作简单、快速,很受实验室人员欢迎,但实验室污染也并未因此得到解决。
  之后出现的四、五代试剂盒技术出现解决了往代试剂盒存在的缺陷,是为临床荧光PCR技术的一场革命。
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