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植物elisa试剂盒操作注意事项

浏览次数:334发布日期:2023-02-21
  植物elisa试剂盒采用双抗体一步夹心法免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被抗体的微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成黄色。颜色的深浅和样品中的呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
 
  植物elisa试剂盒操作注意事项:
 
  1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
 
  2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
 
  3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
 
  4.请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请乘以总稀释倍数(×n×5)。
 
  5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
 
  6.底物请避光保存。
 
  7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
 
  8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
 
  9.本试剂不同批号组分不得混用。
 
  植物elisa试剂盒结果判定:
 
  试验有效性:阳性对照孔平均值≥1.00; 阴性对照平均值≤0.10
 
  临界值(CUT OFF)计算:临界值=阴性对照孔平均值+0.15
 
  阴性判定:样品OD值< 临界值(CUT OFF)者为甘薯病毒(SPV)阴性
 
  阳性判定:样品OD值≥ 临界值(CUT OFF)者为甘薯病毒(SPV)阳性
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