人ELISA试剂盒的检测方法:基于酶联免疫吸附技术
浏览次数:351发布日期:2024-12-10
人ELISA试剂盒是一种用于检测特定蛋白质或细胞因子在样本中含量的重要工具。其基本原理是利用酶联免疫吸附技术(ELISA),通过特异性抗体与待测抗原的结合,实现对目标物质的定量分析。
-定义:人ELISA试剂盒是一种基于酶联免疫吸附技术的检测方法,通过特异性抗体与抗原结合,形成免疫复合物,进而通过酶标记和底物反应,实现对目标物质的定量检测。
-原理:采用双抗体夹心法,将特异性抗体预包被在高亲和力的酶标板上,加入标准品和待测样本后,再加入生物素化的检测抗体,经过孵育和洗涤,加入酶标记的链霉亲和素,通过显色反应,颜色的深浅与样本中目标物质的浓度成正比。
人ELISA试剂盒的主要组分:
-预包被板:通常为96孔或48孔板,预先包被了抗目标物质的单克隆抗体。
-标准品:用于制作标准曲线的已知浓度的目标物质溶液。
-检测抗体:生物素标记的抗目标物质抗体。
-酶标记物:通常是辣根过氧化物酶(HRP)标记的链霉亲和素。
-底物溶液:如TMB(四甲基联苯胺),与酶反应产生颜色变化。
-终止液:通常为硫酸溶液,用于终止反应。
人ELISA试剂盒广泛应用于医学研究、临床诊断和生物学实验等领域,可用于检测血清、血浆、细胞培养上清液等样本中的多种蛋白质和细胞因子,如白细胞介素(IL)、肿瘤坏死因子(TNF)、转化生长因子(TGF)、干扰素(IFN)等。这些指标在炎症反应、免疫调节、细胞增殖和凋亡等方面具有重要意义。