人总蛋白SELISA试剂盒

人总蛋白S英文名称：TPS ELISA Kit产品别名：人TPS elisa试剂盒用于测定血清，血浆及相关液体等样本。例如适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本。

试剂配制：

1、酶联板（Assay plate ）：一块（96孔或者48孔）。
2、标准品（Standard）：2瓶（冻干品）。
3、样品稀释液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。
4、生物素标记抗体稀释液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5、辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6、生物素标记抗体（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7、辣根过氧化物酶标记亲和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8、底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。
9、浓洗涤液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10、终止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。
样本处理及要求：
1.  血清：将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过一夜，然后1000×g离心20 分钟，取上清即可，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
2.  血浆：用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本，并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
3.  组织匀浆：用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样品对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂）加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟，取上清检测。
4.  细胞培养物上清或其它生物标本：请1000×g离心20分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

注意事项：

1.使用前请保存在2-8℃。复溶后的标准品若未用完，请废弃。
2. 微量试剂运输中颠簸和可能的倒置，会使液体沾到管壁或瓶盖。因此使用前请1000转/分离心1分钟，以使附着管壁或瓶盖的液体沉积到管底。
3. 从冰箱中取出的浓缩洗涤液可能有结晶,属于正常现象，微加热至40℃使结晶*溶解后再配制洗涤液。
（加热温度不要超过50℃）使用时洗涤液应为室温。
4. 不同批号的试剂盒组份避免混用（洗涤液和反应终止液除外）。
5. 充分轻微混匀对反应结果尤为重要，使用微量振荡器，如无微量振荡器，可在反应孵育前手工轻轻混匀。
6. 在试验中标准品和样本检测时建议作双孔检测。
7. 试验中所用的试管和吸头均为一次性使用，严禁在不同的液体之间混用！否则将影响试验结果。
8. 试验中请穿着试验服并带乳胶手套做好防护工作。特别是检测血液或者其他体液标本时，请按国家生物试验室安全防护条列执行。
以下是公司正在热销的产品：

 亮白曲霉Anti-ATF1/FITC  荧光素标记活化复制因子1抗体IgG

 泡盛曲霉色变种Anti-ATR/ACTR(phospho Ser428) /FITC  荧光素标记兔抗人、大、小鼠酸化ATR抗体IgG

 泡盛曲霉Anti-ATF2/FITC  荧光素标记活化复制因子2抗体IgG

 金头曲霉Anti-phospho-ATF2(Thr69/71) /FITC  荧光素标记兔抗人、大、小鼠、猴酸化活化复制因子2(phospho ATF 2)抗体IgG

 鲜橙曲霉Anti-ATF3/FITC  荧光素标记活化转录因子3抗体IgG

人总蛋白SELISA试剂盒 无壳曲霉Anti-ATF4/FITC  荧光素标记活化转录因子4抗体IgG

 糙孢曲霉Anti-ATF6/FITC  荧光素标记活化转录因子6抗体IgG

 洋葱曲霉Anti-ATG1/ULK1/FITC  荧光素标记自噬相关蛋白1抗体IgG

 匍匐放射毛霉或雅致放射毛霉Anti-ATG7/FITC  荧光素标记自噬相关蛋白7抗体IgG

 匍匐放射毛霉或雅致放线毛霉Anti-thrombin II /FITC  荧光素标记凝血酶Ⅱ抗体IgG

 李克犁头霉（伞枝梨头霉）Anti-ATH III /FITC  荧光素标记抗凝血酶Ⅲ抗体IgG

 李克犁头霉或伞枝梨头霉Anti-ATM/FITC  荧光素标记毛细血管扩张性共济失调症突变蛋白抗体IgG

 皮状丝孢酵母Anti-Phospho-PAK4 (Ser99)/FITC  荧光素标记酸化p21激活激酶4抗体IgG

 皮状丝孢酵母Anti-ATP2c1/Ca++ ATPase/FITC  荧光素标记钙离子ATP酶通道蛋白抗体IgG

 贝雷丝孢酵母Anti-ATP4B/H+K+ ATPase/FITC  荧光素标记钾ATP酶通道蛋白抗体IgG 烯人苯酸诺龙elisa试盒

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 三烯四胺人半胱酸蛋白酶抑制elisa试盒

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 肌酸酐人白血病抑制因子elisa试盒

 环砜人白细胞调节素elisa试盒

 1,2-二烯人骨成型蛋白2elisa试盒

操作流程：
（1）待测样品孔中每孔加入待测样品100μl，每种样品设3个平行孔；设两个阴性对照孔，每孔加未处理组的细胞裂解液100μl；另设一个空白对照孔，加入纯细胞裂解液100μl。 
（2）酶标板置4℃，包被过夜。
（3）洗板：吸干孔内反应液，用洗涤液过洗一遍（将洗涤液注满板孔后，即甩去），之后将洗涤液注满板孔，浸泡1-2分钟，间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
（4）阴性对照孔每孔加入PBS 50μl，样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。 
（5）酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。 
（8）酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB显色液 100μl，轻轻混匀10s，置37℃暗处反应15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。 
（12）分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，终测得的OD值为两者之差（W1-W2），以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
（13）数据处理：在得出标本（S）和阴性对照（N）的 OD值后，计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。