操作流程:
(1)待测样品孔中每孔加入待测样品100μl,每种样品设3个平行孔;设两个阴性对照孔,每孔加未处理组的细胞裂解液100μl;另设一个空白对照孔,加入纯细胞裂解液100μl。
(2)酶标板置4℃,包被过夜。
(3)洗板:吸干孔内反应液,用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去),之后将洗涤液注满板孔,浸泡1-2分钟,间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
(4)阴性对照孔每孔加入PBS 50μl,样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。
(5)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。
(8)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB显色液 100μl,轻轻混匀10s,置37℃暗处反应15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。
(12)分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,终测得的OD值为两者之差(W1-W2),以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
(13)数据处理:在得出标本(S)和阴性对照(N)的 OD值后,计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。
人胃内因子英文名称:GIF ELISA kit产品别名:人GIF elisa试剂盒用于测定血清,血浆及相关液体等样本。例如适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本。
产品名称 | 人胃内因子ELISA试剂盒 |
英文名称 | GIF ELISA kit |
货号 | CS-E3896 |
试剂配制:
1、酶联板(Assay plate ):一块(96孔或者48孔)。
2、标准品(Standard):2瓶(冻干品)。
3、样品稀释液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素标记抗体稀释液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素标记抗体(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根过氧化物酶标记亲和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、浓洗涤液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10、终止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
样本处理及要求:
1. 血清:将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过一夜,然后1000×g离心20 分钟,取上清即可,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
2. 血浆:用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本,并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
3. 组织匀浆:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检测。
4. 细胞培养物上清或其它生物标本:请1000×g离心20分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
注意事项:
1.使用前请保存在2-8℃。复溶后的标准品若未用完,请废弃。
2. 微量试剂运输中颠簸和可能的倒置,会使液体沾到管壁或瓶盖。因此使用前请1000转/分离心1分钟,以使附着管壁或瓶盖的液体沉积到管底。
3. 从冰箱中取出的浓缩洗涤液可能有结晶,属于正常现象,微加热至40℃使结晶*溶解后再配制洗涤液。
(加热温度不要超过50℃)使用时洗涤液应为室温。
4. 不同批号的试剂盒组份避免混用(洗涤液和反应终止液除外)。
5. 充分轻微混匀对反应结果尤为重要,使用微量振荡器,如无微量振荡器,可在反应孵育前手工轻轻混匀。
6. 在试验中标准品和样本检测时建议作双孔检测。
7. 试验中所用的试管和吸头均为一次性使用,严禁在不同的液体之间混用!否则将影响试验结果。
8. 试验中请穿着试验服并带乳胶手套做好防护工作。特别是检测血液或者其他体液标本时,请按国家生物试验室安全防护条列执行。
以下是公司正在热销的产品:
6倍性凝胶DNA电泳上样缓冲液IRS-4 胰岛素受体底物-4(抗原)
RNA电泳样品处理液AQP5(aquaporin Protein-5) 水通道蛋白-5抗原
分子生物级化锭(Ethidium Bromide)染色液(1毫克/毫升)或(10毫克/毫升)IRS P53 (Insulin receptor substrate P53)(多肽)
SYBR绿色荧光核酸染色试盒(配制25毫升/次)Integrin Beta chain (ITG- Beta3/ITGB3) 整合素-β3(抗原)
SYBR绿色荧光核酸染色(20X)AQP9(aquaporin Protein-9) 水通道蛋白-9抗原 (多肽抗原)
酚蓝(BROMPHENOL BLUE)溶液(100毫克/毫升)Leptin 瘦素(多肽抗原)
DNA银染试盒Leptin receptor(long) 瘦素受体(长)(抗原)
细胞荧光素酶活性化学发光法定量检测试盒phospho-AR/androgen receptor( p-Ser580)peptide 雄激素受体(多肽)
人胃内因子ELISA试剂盒细胞β-半乳糖苷酶活性原位染色试盒MAPK-1/2 丝裂原活化蛋白激酶(抗原)
全组织β-半乳糖苷酶活性原位染色试盒MAPKK2 丝裂原活化蛋白激酶激酶
冰冻切片β-半乳糖苷酶活性原位染色试盒M2-PK ( pyruvate Kinase M2) 酸激酶-M2(抗原)
细菌β-半乳糖苷酶活性原位染色试盒M2-PK ( pyruvate Kinase M2 ) 酸激酶-M2(抗原)
细菌β-半乳糖苷酶活性化学发光法定量检测试盒p-Arhgef2/GEF-H1(Rho guanine nucleotide exchange factor 2,pSer810) 酸化Rho鸟苷酸交换因子2抗原
β-半乳糖苷酶标准曲线化学发光法测定试盒Melan-A/MART-1 黑色素-A(抗原)
细菌β-半乳糖苷酶活性比色法定量检测试盒ARIP2a(Activin receptor 2A) 激活素受体2A/激活素受体相互作用蛋白2a抗原Alexa Fluor 555-Goat Anti-Rabbit IgG(H+L)
Alexa Fluor 555-Goat Anti-Rabbit IgG(H+L)英文名称标准品猪可溶性细胞间粘附分子1(sICAM-1)ELISA Kit,48T/96T 500mg
ZNF211英文名称:Phospho-TAK1(Ser192)FAS凋亡抑制分子2
histone H3-like protein英文名称:ASPP1(apoptosis stimulating protein of P53 1)线粒体翻译起始因子3抗体 C20orf7英文名称:BEND2人氧还原蛋白过氧化物酶4(PRDX4)免疫试盒
英文名称标准品大鼠可溶性细胞间粘附分子1(sICAM-1)ELISA Kit,48T/96T 150mg
ZNF749英文名称:TSPYL5表皮细胞表面原1体
C20orf79 英文名称:Bone Sialoprotein人氧化型谷胱甘肽(GSSG)免疫试盒
英文名称标准品兔子可溶性细胞间粘附分子1(sICAM-1)ELISA Kit,48T/96T 15mg
phospho-ZAP70 (Tyr292)英文名称:TGF Beta 1+2+3凝血因子9体
C20orf94英文名称:Vibrio Parahemolyticus Polar flagellin B/D人氧化高密度脂蛋白(Ox-HDL)免疫试盒
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