操作流程:
(1)待测样品孔中每孔加入待测样品100μl,每种样品设3个平行孔;设两个阴性对照孔,每孔加未处理组的细胞裂解液100μl;另设一个空白对照孔,加入纯细胞裂解液100μl。
(2)酶标板置4℃,包被过夜。
(3)洗板:吸干孔内反应液,用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去),之后将洗涤液注满板孔,浸泡1-2分钟,间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
(4)阴性对照孔每孔加入PBS 50μl,样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。
(5)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。
(8)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB显色液 100μl,轻轻混匀10s,置37℃暗处反应15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。
(12)分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,终测得的OD值为两者之差(W1-W2),以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
(13)数据处理:在得出标本(S)和阴性对照(N)的 OD值后,计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。
人天青杀素/肝素结合蛋白英文名称:AZU/HBP ELISA Kit产品别名:人AZU/HBP elisa试剂盒用于测定血清,血浆及相关液体等样本。例如适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本。
产品名称 | 人天青杀素/肝素结合蛋白ELISA试剂盒 |
英文名称 | AZU/HBP ELISA Kit |
货号 | CS-E3940 |
试剂配制:
1、酶联板(Assay plate ):一块(96孔或者48孔)。
2、标准品(Standard):2瓶(冻干品)。
3、样品稀释液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素标记抗体稀释液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素标记抗体(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根过氧化物酶标记亲和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、浓洗涤液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10、终止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
样本处理及要求:
1. 血清:将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过一夜,然后1000×g离心20 分钟,取上清即可,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
2. 血浆:用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本,并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
3. 组织匀浆:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检测。
4. 细胞培养物上清或其它生物标本:请1000×g离心20分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
注意事项:
1.使用前请保存在2-8℃。复溶后的标准品若未用完,请废弃。
2. 微量试剂运输中颠簸和可能的倒置,会使液体沾到管壁或瓶盖。因此使用前请1000转/分离心1分钟,以使附着管壁或瓶盖的液体沉积到管底。
3. 从冰箱中取出的浓缩洗涤液可能有结晶,属于正常现象,微加热至40℃使结晶*溶解后再配制洗涤液。
(加热温度不要超过50℃)使用时洗涤液应为室温。
4. 不同批号的试剂盒组份避免混用(洗涤液和反应终止液除外)。
5. 充分轻微混匀对反应结果尤为重要,使用微量振荡器,如无微量振荡器,可在反应孵育前手工轻轻混匀。
6. 在试验中标准品和样本检测时建议作双孔检测。
7. 试验中所用的试管和吸头均为一次性使用,严禁在不同的液体之间混用!否则将影响试验结果。
8. 试验中请穿着试验服并带乳胶手套做好防护工作。特别是检测血液或者其他体液标本时,请按国家生物试验室安全防护条列执行。
以下是公司正在热销的产品:
冰冻切片半胱酸蛋白酶-2(CASPASE-2)活性原位荧光染色检测试盒ORX-A(orexin-A) 增食欲素-A/欲激素A抗原
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冰冻切片半胱酸蛋白酶-3(CASPASE-3)活性原位荧光染色检测试盒OXR (Orexin receptor) 食欲素受体(多肽)
活体细胞半胱酸蛋白酶-4(CASPASE-4)活性原位荧光染色检测试盒P2P-R/RBBP6(proliferation potential protein related) 增殖潜能相关蛋白抗原
冰冻切片半胱酸蛋白酶-4(CASPASE-4)活性原位荧光染色检测试盒P19ARF p19ARF抑癌基因抗原
活体细胞半胱酸蛋白酶-5(CASPASE-5)活性原位荧光染色检测试盒phospho-p38 ERK/MAPK14 (pThr180/pTyr182) peptide 酸化丝裂原活化蛋白激酶p38抗原
冰冻切片半胱酸蛋白酶-5(CASPASE-5)活性原位荧光染色检测试盒MKK3(MAP Kinase Kinase 3) 丝裂原活化蛋白激酶MKK3/6抗原
活体细胞半胱酸蛋白酶-6(CASPASE-6)活性原位荧光染色检测试盒P53(wt-p53) 肿瘤抑制基因抗原(野生型P53)
冰冻切片半胱酸蛋白酶-6(CASPASE-6)活性原位荧光染色检测试盒Mtp53(Mutant type p53) 突变型P53抗原
活体细胞半胱酸蛋白酶-7(CASPASE-7)活性原位荧光染色检测试盒WIG-1(wtp53-induced gene 1) 野生型p53诱导基因1抗原
冰冻切片半胱酸蛋白酶-7(CASPASE-7)活性原位荧光染色检测试盒P73 protein P73肿瘤抑制基因抗原
人天青杀素/肝素结合蛋白ELISA试剂盒活体细胞半胱酸蛋白酶-8(CASPASE-8)活性原位荧光染色检测试盒p70 S6 Kinase/P70 Beta1 p70S6Kb抗原
冰冻切片半胱酸蛋白酶-8(CASPASE-8)活性原位荧光染色检测试盒PALB2(partner and locaizer of BRCA2) 乳腺癌易感基因相关蛋白2
活体细胞半胱酸蛋白酶-9(CASPASE-9)活性原位荧光染色检测试盒PAFR/PTAFR 血小板活化因子受体抗原
冰冻切片半胱酸蛋白酶-9(CASPASE-9)活性原位荧光染色检测试盒Phospho-PAK4 (Ser99) peptide 酸化p21激活激酶4多肽抗原Bovine BOLA-DQA2(Bos taurus major histocompatibility complex class II DQ alpha 2) ELISA Kit
Bovine BOLA-DQA2(Bos taurus major histocompatibility complex class II DQ alpha 2) ELISA KitC3orf32英文名称:Bile salt-activated lipase人血小板膜糖蛋白Ⅳ(GP-Ⅳ)免疫试盒
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C3orf36英文名称:BDH1人血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)免疫试盒
99%100Tβ1R-Ab
SMC4英文名称:phospho-Tau protein(Ser356)自主生长因子GFI1抗体
C3orf38英文名称:BAAT人血小板激活因子酰水解酶2,细胞质(PAFAH2)免疫试盒
99%50TCc-Ab
Nuclear protein stromal antigen 1英文名称:phospho-Tau protein(Thr181)G蛋白偶联受体109A抗体
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