操作流程:
(1)待测样品孔中每孔加入待测样品100μl,每种样品设3个平行孔;设两个阴性对照孔,每孔加未处理组的细胞裂解液100μl;另设一个空白对照孔,加入纯细胞裂解液100μl。
(2)酶标板置4℃,包被过夜。
(3)洗板:吸干孔内反应液,用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去),之后将洗涤液注满板孔,浸泡1-2分钟,间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
(4)阴性对照孔每孔加入PBS 50μl,样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。
(5)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。
(8)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB显色液 100μl,轻轻混匀10s,置37℃暗处反应15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。
(12)分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,终测得的OD值为两者之差(W1-W2),以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
(13)数据处理:在得出标本(S)和阴性对照(N)的 OD值后,计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。
人羟赖氨酸糖苷英文名称:HOLG ELISA kit产品别名:人HOLG elisa试剂盒用于测定血清,血浆及相关液体等样本。例如适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本。
产品名称 | 人羟赖氨酸糖苷ELISA试剂盒 |
英文名称 | HOLG ELISA kit |
货号 | CS-E4092 |
试剂配制:
1、酶联板(Assay plate ):一块(96孔或者48孔)。
2、标准品(Standard):2瓶(冻干品)。
3、样品稀释液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素标记抗体稀释液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素标记抗体(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根过氧化物酶标记亲和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、浓洗涤液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10、终止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
样本处理及要求:
1. 血清:将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过一夜,然后1000×g离心20 分钟,取上清即可,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
2. 血浆:用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本,并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
3. 组织匀浆:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检测。
4. 细胞培养物上清或其它生物标本:请1000×g离心20分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
注意事项:
1.使用前请保存在2-8℃。复溶后的标准品若未用完,请废弃。
2. 微量试剂运输中颠簸和可能的倒置,会使液体沾到管壁或瓶盖。因此使用前请1000转/分离心1分钟,以使附着管壁或瓶盖的液体沉积到管底。
3. 从冰箱中取出的浓缩洗涤液可能有结晶,属于正常现象,微加热至40℃使结晶*溶解后再配制洗涤液。
(加热温度不要超过50℃)使用时洗涤液应为室温。
4. 不同批号的试剂盒组份避免混用(洗涤液和反应终止液除外)。
5. 充分轻微混匀对反应结果尤为重要,使用微量振荡器,如无微量振荡器,可在反应孵育前手工轻轻混匀。
6. 在试验中标准品和样本检测时建议作双孔检测。
7. 试验中所用的试管和吸头均为一次性使用,严禁在不同的液体之间混用!否则将影响试验结果。
8. 试验中请穿着试验服并带乳胶手套做好防护工作。特别是检测血液或者其他体液标本时,请按国家生物试验室安全防护条列执行。
以下是公司正在热销的产品:复
2-chloro-4-iodopyridineTPS(Human Total protein S) ELISA Kit 人总蛋白S
伐尼克兰酰2,3,4-tri-o-acetyl -β- d-glucuronide基SDPR(human serum deprivation response) ELISA Kit 人血清剥夺反应相关蛋白
(S)-盐酸乐卡地平HNP1-3(Human neutrophil peptide 1-3) ELISA Kit 人中性粒细胞防御素1-3
人羟赖氨酸糖苷ELISA试剂盒清算银行(十七氟辛基)膦酸钠ECP(Human eosinophil cationic protein) ELISA Kit 人嗜酸性粒细胞阳离子蛋白
(一、研究)—PS(Human plasma anticoagulant protein S) ELISA Kit 人血浆抗凝蛋白S
4 -苄基双酚Aβ- d-glucuronidPC(Human plasma anticoagulant protein C) ELISA Kit 人血浆抗凝蛋白C
6-trifluoromethyl-3-pyridinesulfonyl化Fc Gamma(Human Fc region of immunoglobulin G) ELISA Kit 人免疫球蛋白G Fc片段
t-boc-aminocaproicnitrilotriacetic酸CyPB(Human cyclophilin B) ELISA Kit 人嗜环蛋白/亲环素B
双(2-基己基)phthalate-d4C4BP(Human C4 binding protein) ELISA Kit 人C4结合蛋白
alcophosphamideC3c(Human Complement fragment 3c) ELISA Kit 人补体片段3c
α,α”diethyl-4,4’-二羟基二苯基二醇4,4’-二酸C7(Human Complement fragment 3c0 ELISA Kit 人补体7
pilocarpic acid-d3钠盐A Beta1-42(Human amyloid beta peptide 1-42) ELISA Kit 人β淀粉样蛋白1-42
2-hexyl-3-oxo-5 - [(tetrahydro-2h-pyran-2-yl)氧基] -棕榈酸酯Human chemerin ELISA Kit 人chemerin
(2-羧基)-三苯基化F XII (Human coagulation factor XII ) ELISA Kit 人凝血因子Ⅻ
S(α- methylcarboxymethyl)glutathione-d4基F X III (Human coagulation factor X III ) ELISA Kit 人凝血因子ⅩⅢChicken BMP-2(Bone Morphogenetic Protein 2) ELISA Kit
Chicken BMP-2(Bone Morphogenetic Protein 2) ELISA Kit≥98%50TSULF1
化学,合成试, N--3-氧胺
Snake poison Protein英文名称:Endothelin B Receptor谷胱甘肽S转移酶θ2抗体 C9orf5英文名称:ASAH2兔子Dickkopf 1(DKK1)免疫试盒
≥98%50TRARRES1
化学,合成试, 叠氮化三烷
C9orf50英文名称:ASAM兔子C反应蛋白(CRP)免疫试盒
≥98%100TBAG3
化学,固相合成, 2,2,2-三-1-(3,4,5-三) 97%100TSIRT3
C9orf57英文名称:AAV5 capsid VP2 protein兔子CD34分子(CD34)免疫试盒
©2023 上海莼试生物技术有限公司 版权所有 备案号:沪ICP备17029297号-3 技术支持:化工仪器网 GoogleSitemap 总访问量:60092 管理登陆