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人成熟促进因子(MPF)免疫组化试剂盒​实验步骤

浏览次数:98发布日期:2021-12-09

人成熟促进因子(MPF)免疫组化试剂盒实验步骤:


1.烤片: 将待做切片置于切片架上,于60℃恒温烤箱中至少烤1 hr;


2.脱蜡: 切片放入盛有二甲苯的容器中脱蜡3 次(即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ),每次10 min;


3.水化: 切片经下行酒精水化,无水乙醇5min,95%乙醇2 次(每次2min),85%乙醇2 min;75%乙醇2min,自来水冲洗,ddH2O 洗2×2min;


4.抗原修复: 根据抗体说明书推荐方法进行抗原修复,常采用高压、微波(温

度达到98~100℃)或酶消化修复法,室温自然冷却,自来水冲洗,ddH2O 洗2×2min,TBS 洗涤(2×2min)(具体修复方法见附1)* 注:有些抗原勿需修复,直接进入第5 步封闭。


5.封闭: 滴加试剂B,37℃湿盒孵育30 min;


6.加一抗:滴加用试剂C(即用型一抗),37℃湿盒孵育2 hr 或4℃过夜;


7.洗涤: TBS-T 洗涤(3×5 min);


8.封闭: 滴加试剂B,37℃湿盒孵育10 min;


9.加二抗: 滴加用抗体稀释液稀释的生物素化二抗(试剂D),37℃湿盒中孵育30 min;


10.洗涤: TBS-T 洗涤(3×5 min);


11.封闭: 滴加试剂Tween 20,37℃湿盒孵育封闭20 min;


12.加HRP-SA: 滴加用抗体稀释液稀释的试剂E(1:50~200,终浓度5~20 nM),


37℃湿盒中孵育30 min;


13.洗涤: TBS-T 洗涤(3×5 min),TBS 洗涤(2×5 min);


14.显色:应用DAB 溶液(试剂F)显色;


15.复染:自来水充分冲洗,复染,脱水,透明;


16.封片: 待组织标本干后,用试剂缓冲甘油封固剂封片;


17.观察成像: 显微镜下观察成像。

磷酸化APP淀粉样肽前体蛋白抗体

磷酸化活化复制因子2抗体

磷酸化活化复制因子2抗体

磷酸化细胞周期末期促进复合蛋白APC1抗体

发育分化增强因子1抗体

磷酸化发育分化增强因子1抗体

蛋白激酶B3

肌动蛋白结合蛋白Girdin抗体

蛋白激酶A2抗体

血管紧张素Ⅱ受体2抗体

ASH1蛋白抗体

芳香乙酰胺脱乙酰基酶样蛋白2抗体

血管内皮细胞迁移蛋白抗体

醛糖还原酶相关蛋白质抗体

胆汁酸结合蛋白DDH2抗体

血管生成素样蛋白3抗体

甘油酯激酶线粒体抗体

磷酸化内收蛋白a1抗体

自噬体ATG16L2蛋白抗体

酸性磷酸酶抗体

酸性磷酸酶抗体

极光激酶A相互作用蛋白1抗体

载脂蛋白样蛋白6抗体


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