人成熟促进因子(MPF)免疫组化试剂盒​实验步骤

人成熟促进因子(MPF)免疫组化试剂盒实验步骤：

1.烤片： 将待做切片置于切片架上，于60℃恒温烤箱中至少烤1 hr；

2.脱蜡： 切片放入盛有二甲苯的容器中脱蜡3 次（即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ），每次10 min；

3.水化： 切片经下行酒精水化，无水乙醇5min，95%乙醇2 次（每次2min），85%乙醇2 min；75%乙醇2min，自来水冲洗，ddH2O 洗2×2min；

4.抗原修复： 根据抗体说明书推荐方法进行抗原修复，常采用高压、微波（温

度达到98~100℃）或酶消化修复法，室温自然冷却，自来水冲洗，ddH2O 洗2×2min，TBS 洗涤（2×2min）（具体修复方法见附1）* 注：有些抗原勿需修复，直接进入第5 步封闭。

5.封闭： 滴加试剂B，37℃湿盒孵育30 min；

6.加一抗：滴加用试剂C（即用型一抗），37℃湿盒孵育2 hr 或4℃过夜；

7.洗涤： TBS-T 洗涤（3×5 min）；

8.封闭： 滴加试剂B，37℃湿盒孵育10 min；

9.加二抗： 滴加用抗体稀释液稀释的生物素化二抗（试剂D），37℃湿盒中孵育30 min；

10.洗涤： TBS-T 洗涤（3×5 min）；

11.封闭： 滴加试剂Tween 20，37℃湿盒孵育封闭20 min；

12.加HRP-SA： 滴加用抗体稀释液稀释的试剂E（1：50~200，终浓度5~20 nM），

37℃湿盒中孵育30 min；

13.洗涤： TBS-T 洗涤（3×5 min），TBS 洗涤（2×5 min）；

14.显色：应用DAB 溶液（试剂F）显色；

15.复染：自来水充分冲洗，复染，脱水，透明；

16.封片： 待组织标本干后，用试剂缓冲甘油封固剂封片；

17.观察成像： 显微镜下观察成像。

磷酸化APP淀粉样肽前体蛋白抗体

磷酸化活化复制因子2抗体

磷酸化活化复制因子2抗体

磷酸化细胞周期末期促进复合蛋白APC1抗体

发育分化增强因子1抗体

磷酸化发育分化增强因子1抗体

蛋白激酶B3

肌动蛋白结合蛋白Girdin抗体

蛋白激酶A2抗体

血管紧张素Ⅱ受体2抗体

ASH1蛋白抗体

芳香乙酰胺脱乙酰基酶样蛋白2抗体

血管内皮细胞迁移蛋白抗体

醛糖还原酶相关蛋白质抗体

胆汁酸结合蛋白DDH2抗体

血管生成素样蛋白3抗体

甘油酯激酶线粒体抗体

磷酸化内收蛋白a1抗体

自噬体ATG16L2蛋白抗体

酸性磷酸酶抗体

酸性磷酸酶抗体

极光激酶A相互作用蛋白1抗体

载脂蛋白样蛋白6抗体