RT-PCR试剂盒使用注意事项

　　RT-PCR试剂盒逆转录和PCR在同一反应体系中进行，反应过程中无需添加试剂，无需打开管盖，在避免污染的同时提高了检测灵敏度和实验效率。本试剂盒包括全新高效逆转录酶、快速热启动DNA聚合酶，同时包含适用于逆转录和PCR扩增的反应缓冲液和实验中所需的反应组分。经过重组表达的SuperRT逆转录酶RNaseH活性缺失，减少了逆转录反应中RNA的降解，更容易获得全长的cDNA。

　　该逆转酶逆转录效率高，可对少量RNA模板进行良好的逆转录反应。SuperRT逆转录酶与RNA亲合性高，能通读GC含量高，二级结构复杂的RNA模板，获得高产量的cDNA。PCR反应使用的DNA聚合酶具有扩增效率高、延伸速度快的优良性能。*的缓冲体系使逆转录酶和聚合酶同时发挥功效。使用该试剂盒能够方便快捷的在同一个反应管内完成逆转录和PCR扩增反应。使用本试剂盒扩增得到的目的产物3′端附有一个″A″碱基，可直接用于T/A克隆。

　　RT-PCR试剂盒注意事项：

　　1.用于cDNA合成反应的溶液试剂尽量可能用DEPC进行处理，并在高压灭菌后使用。有些试剂不能高压灭菌时，首先用经过灭菌的器具、水等配制溶液后，再将溶液进行过滤除菌处理。

　　2.RNA样品要避免基因组DNA污染。

　　3.避免多次反复冻融RNA，使RNA保持在冰浴中处融化状态。

　　4.试剂盒的各组成成分应在-20℃保存。

　　5.cDNA产物应置于-20℃保存。

　　RT-PCR试剂盒合理配备了与cDNA链合成反应相关的各种组分，该试剂盒中的TIANScriptM-MLV具有高效的逆转录酶活性，对后续的PCR或定量PCR实验兼容性好，适合于各种PCR耐热聚合酶。