操作流程:
(1)待测样品孔中每孔加入待测样品100μl,每种样品设3个平行孔;设两个阴性对照孔,每孔加未处理组的细胞裂解液100μl;另设一个空白对照孔,加入纯细胞裂解液100μl。
(2)酶标板置4℃,包被过夜。
(3)洗板:吸干孔内反应液,用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去),之后将洗涤液注满板孔,浸泡1-2分钟,间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
(4)阴性对照孔每孔加入PBS 50μl,样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。
(5)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。
(8)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB显色液 100μl,轻轻混匀10s,置37℃暗处反应15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。
(12)分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,终测得的OD值为两者之差(W1-W2),以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
(13)数据处理:在得出标本(S)和阴性对照(N)的 OD值后,计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。
人血管内皮生长因子受体1英文名称:VEGFR-1/Flt1 ELISA kit产品别名:人VEGFR-1/Flt1 elisa试剂盒用于测定血清,血浆及相关液体等样本。例如适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本。
产品名称 | 人血管内皮生长因子受体1ELISA试剂盒 |
英文名称 | VEGFR-1/Flt1 ELISA kit |
货号 | CS-E3818 |
试剂配制:
1、酶联板(Assay plate ):一块(96孔或者48孔)。
2、标准品(Standard):2瓶(冻干品)。
3、样品稀释液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素标记抗体稀释液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素标记抗体(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根过氧化物酶标记亲和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、浓洗涤液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10、终止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
样本处理及要求:
1. 血清:将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过一夜,然后1000×g离心20 分钟,取上清即可,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
2. 血浆:用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本,并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
3. 组织匀浆:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检测。
4. 细胞培养物上清或其它生物标本:请1000×g离心20分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
注意事项:
1.使用前请保存在2-8℃。复溶后的标准品若未用完,请废弃。
2. 微量试剂运输中颠簸和可能的倒置,会使液体沾到管壁或瓶盖。因此使用前请1000转/分离心1分钟,以使附着管壁或瓶盖的液体沉积到管底。
3. 从冰箱中取出的浓缩洗涤液可能有结晶,属于正常现象,微加热至40℃使结晶*溶解后再配制洗涤液。
(加热温度不要超过50℃)使用时洗涤液应为室温。
4. 不同批号的试剂盒组份避免混用(洗涤液和反应终止液除外)。
5. 充分轻微混匀对反应结果尤为重要,使用微量振荡器,如无微量振荡器,可在反应孵育前手工轻轻混匀。
6. 在试验中标准品和样本检测时建议作双孔检测。
7. 试验中所用的试管和吸头均为一次性使用,严禁在不同的液体之间混用!否则将影响试验结果。
8. 试验中请穿着试验服并带乳胶手套做好防护工作。特别是检测血液或者其他体液标本时,请按国家生物试验室安全防护条列执行。
以下是公司正在热销的产品:
载玻片细胞αSMA蛋白表达荧光显微镜检测试盒Anti-RRM1/FITC 荧光素标记抗核糖核苷酸还原酶1抗体IgG
冰冻切片组织αSMA蛋白表达荧光显微镜检测试盒Anti-RhoA /FITC 荧光素标记RhoA抗体IgG
石蜡切片组织αSMA蛋白表达荧光显微镜检测试盒Anti-RhoC /FITC 荧光素标记RhoC抗体IgG
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石蜡切片组织αSMA蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试盒Anti-RNF148/FITC 荧光素标记环指蛋白148抗体IgG
人血管内皮生长因子受体1ELISA试剂盒 细胞αSMA蛋白表达比色法定量检测试盒Anti-ROCK1 /FITC 荧光素标记Rho相关蛋白激酶1抗体IgG
细胞αSMA蛋白表达荧光定量检测试盒Anti-ROCK2/FITC 荧光素标记Rho相关蛋白激酶2抗体IgG
αSMA蛋白表达西方杂交分析试盒Anti-ROS/FITC 荧光素标记活性氧簇ROS抗体IgG
αSMA蛋白免疫共沉淀分析试盒Anti-RPLP0/FITC 荧光素标记酸性核糖体蛋白大亚基P0抗体IgG
αSMA蛋白表达ELISA定量检测试盒Anti-RRAD/FITC 荧光素标记RRAD抗体IgG
细胞APC蛋白表达流式细胞仪检测试盒Anti-Runx3/FITC 荧光素标记新型抑癌基因/一种新发现的抑癌基因抗体IgG
载玻片细胞APC蛋白表达荧光显微镜检测试盒Anti-RUNX1/AML1/FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠急性髓细胞白血病1蛋白抗体IgG
冰冻切片组织APC蛋白表达荧光显微镜检测试盒Anti-RUNX1/AML1(phospho Ser249) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠酸化急性髓细胞白血病1蛋白抗体IgG
石蜡切片组织APC蛋白表达荧光显微镜检测试盒Anti-RUNX1/AML1(phospho SerS303) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠酸化急性髓细胞白血病1蛋白抗体IgGHRP conjugated Donkey Anti-Mouse IgG (H+L)
HRP conjugated Donkey Anti-Mouse IgG (H+L)英文名称对照品人可溶性粘附分子(Sam)ELISA Kit,48T/96T 200mg
Coxsackie Adenovirus Receptor英文名称:B4GALT7人血管内皮细胞生长因子(VEGF165)免疫试盒
Somatostatin Receptor 2英文名称:phospho-TCF3 (Ser39)G蛋白偶联受体GPR176蛋白抗体
英文名称对照品兔子可溶性粘附分子(Sam)ELISA Kit,48T/96T 100mg
CDC4英文名称:BEND5人血管内皮生长因子受体1(VEGFR-1/Flt1)免疫试盒
Somatostatin Receptor 5英文名称:Tbx21G蛋白偶联受体GPR10蛋白抗体
英文名称对照品人冷球蛋白(CG)ELISA Kit,48T/96T 100mg
Cell adhesion molecule 4英文名称:BBS5人血管内皮生长因子121(VEGF121)免疫试盒
synaptotagmin-2英文名称:Phospho-TrkA(Tyr496) +TrkB(Tyr516)G蛋白偶联受体C5L2蛋白抗体 C1orf129英文名称:CDC40人清道夫受体类B成员1(SCARB1)免疫试盒
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