试剂配制:
1、酶联板(Assay plate ):一块(96孔或者48孔)。
2、标准品(Standard):2瓶(冻干品)。
3、样品稀释液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素标记抗体稀释液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素标记抗体(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根过氧化物酶标记亲和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、浓洗涤液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10、终止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
人细胞色素b561英文名称:human cytb561 ELISA Kit产品别名:人cytb561 elisa试剂盒用于测定血清,血浆及相关液体等样本。例如适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本。
产品名称 | 人细胞色素b561ELISA试剂盒 |
英文名称 | human cytb561 ELISA Kit |
货号 | CS-E3884 |
操作流程:
(1)待测样品孔中每孔加入待测样品100μl,每种样品设3个平行孔;设两个阴性对照孔,每孔加未处理组的细胞裂解液100μl;另设一个空白对照孔,加入纯细胞裂解液100μl。
(2)酶标板置4℃,包被过夜。
(3)洗板:吸干孔内反应液,用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去),之后将洗涤液注满板孔,浸泡1-2分钟,间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
(4)阴性对照孔每孔加入PBS 50μl,样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。
(5)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。
(8)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB显色液 100μl,轻轻混匀10s,置37℃暗处反应15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。
(12)分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,终测得的OD值为两者之差(W1-W2),以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
(13)数据处理:在得出标本(S)和阴性对照(N)的 OD值后,计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。
样本处理及要求:
1. 血清:将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过一夜,然后1000×g离心20 分钟,取上清即可,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
2. 血浆:用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本,并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
3. 组织匀浆:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检测。
4. 细胞培养物上清或其它生物标本:请1000×g离心20分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
以下是公司正在热销的产品:
动物组织基因组DNA分离试盒多肽产品 多肽产品
96孔板细胞基因组DNA分离试盒ACEI (Angiotensin I Converting Enzyme Inhibitor ) 血管紧张素1转换酶抑制(抗原)
48孔板细胞基因组DNA分离试盒Acinus peptide ACINUS 多肽抗原
赫特法病DNA纯化试盒ACTH (Adrenorticotrophin hormons)(7-23) 促肾上腺皮质激素(7-23)(抗原)
肝病DNA纯化试盒Actin Alpha /Alpha-SMA (Actin alpha , smooth muscle aorta) 肌动蛋白(抗原)
EB病DNA纯化试盒AEBP1 (Adipocyte enhance binding protein 1) 脂肪细胞增强结合蛋白1
HSV病DNA纯化试盒MMP-9(matrix metalloproteinase 9) 基质金属蛋白酶-9(抗原)
HHV病DNA纯化试盒AGER(Advanced glycosylation end product-specific receptor) 晚期糖基化终末产物特异性受体(抗原)
人细胞色素b561ELISA试剂盒小量真菌/酵母细胞基因组DNA纯化试盒14-3-3 protein 14-3-3 蛋白(多肽抗原)
革兰氏阳性细菌基因组DNA纯化试盒14-3-3 family protein(Malus domestica (Apple) (Malus sylvestris)) 植物14-3-3蛋白抗原
革兰氏阴性细菌基因组DNA纯化试盒AIF (Apoptosis-Inducing Factor) 调亡诱导因子(多肽片断抗原)
全血线粒体DNA萃取试盒Adenylate Kinase 1 (AK-1) 腺苷酸激酶-1
纯化线粒体DNA萃取试盒Akt/PKB 蛋白激酶B(抗原)
细胞/组织线粒体DNA萃取试盒2,4-D/KLH(2,4-Dichlorophenoxyacetic acid) 2,4-二苯氧酸偶联血蓝蛋白
细胞/组织基因组/线粒体DNA同步萃取试盒2,4-D/BSA 2,4-二苯氧酸偶联牛血清白蛋白AMCA conjugated Affinipure Goat Anti-Rabbit IgG (H+L)
AMCA conjugated Affinipure Goat Anti-Rabbit IgG (H+L)phospho-c-ABL(Thr413) 英文名称:Adrenomedullin人型肝炎病核心体IgG(HBcAb-IgG)免疫试盒
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PPAR Gamma (peroxisome proliferator-activated receptor-gamma)英文名称:PS-1(NT),Presennillin-1(S182)白介素3抗体
phospho-c-ABL(Tyr204)英文名称:Arfaptin 2人型肝炎病核心体(HBcAb)免疫试盒
英文名称:Acetyl CoA Carboxylase化样蛋白11体(N端)
PP2Ac英文名称:PS-1,Presennillin-1(CT)白介素3受体a链抗体
phospho-c-ABL (Thr754)英文名称:AVPR2人型肝炎病表面体(HBsAb)免疫试盒
ZNF804A英文名称:TSPEAR鸟呤核苷交换因子FARP2体
Runx3英文名称:BRCA1(Breast cancer susceptbility gene 1)(mouse rat)白介素-5受体α链抗体IL-5Rα
注意事项:
1.使用前请保存在2-8℃。复溶后的标准品若未用完,请废弃。
2. 微量试剂运输中颠簸和可能的倒置,会使液体沾到管壁或瓶盖。因此使用前请1000转/分离心1分钟,以使附着管壁或瓶盖的液体沉积到管底。
3. 从冰箱中取出的浓缩洗涤液可能有结晶,属于正常现象,微加热至40℃使结晶*溶解后再配制洗涤液。
(加热温度不要超过50℃)使用时洗涤液应为室温。
4. 不同批号的试剂盒组份避免混用(洗涤液和反应终止液除外)。
5. 充分轻微混匀对反应结果尤为重要,使用微量振荡器,如无微量振荡器,可在反应孵育前手工轻轻混匀。
6. 在试验中标准品和样本检测时建议作双孔检测。
7. 试验中所用的试管和吸头均为一次性使用,严禁在不同的液体之间混用!否则将影响试验结果。
8. 试验中请穿着试验服并带乳胶手套做好防护工作。特别是检测血液或者其他体液标本时,请按国家生物试验室安全防护条列执行。
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