操作流程:
(1)待测样品孔中每孔加入待测样品100μl,每种样品设3个平行孔;设两个阴性对照孔,每孔加未处理组的细胞裂解液100μl;另设一个空白对照孔,加入纯细胞裂解液100μl。
(2)酶标板置4℃,包被过夜。
(3)洗板:吸干孔内反应液,用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去),之后将洗涤液注满板孔,浸泡1-2分钟,间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
(4)阴性对照孔每孔加入PBS 50μl,样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。
(5)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。
(8)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB显色液 100μl,轻轻混匀10s,置37℃暗处反应15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。
(12)分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,终测得的OD值为两者之差(W1-W2),以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
(13)数据处理:在得出标本(S)和阴性对照(N)的 OD值后,计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。
人糖盏蛋白)elisa检测试剂盒英文名称:Human Glycocalicin ELISA kit产品别名:人人糖盏蛋白elisa试剂盒用于测定血清,血浆及相关液体等样本。例如适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本。
产品名称 | 人糖盏蛋白elisa检测试剂盒 |
英文名称 | Human Glycocalicin ELISA kit |
货号 | CS-E3943 |
试剂配制:
1、酶联板(Assay plate ):一块(96孔或者48孔)。
2、标准品(Standard):2瓶(冻干品)。
3、样品稀释液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素标记抗体稀释液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素标记抗体(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根过氧化物酶标记亲和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、浓洗涤液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10、终止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
样本处理及要求:
1. 血清:将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过一夜,然后1000×g离心20 分钟,取上清即可,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
2. 血浆:用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本,并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
3. 组织匀浆:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检测。
4. 细胞培养物上清或其它生物标本:请1000×g离心20分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
注意事项:
1.使用前请保存在2-8℃。复溶后的标准品若未用完,请废弃。
2. 微量试剂运输中颠簸和可能的倒置,会使液体沾到管壁或瓶盖。因此使用前请1000转/分离心1分钟,以使附着管壁或瓶盖的液体沉积到管底。
3. 从冰箱中取出的浓缩洗涤液可能有结晶,属于正常现象,微加热至40℃使结晶*溶解后再配制洗涤液。
(加热温度不要超过50℃)使用时洗涤液应为室温。
4. 不同批号的试剂盒组份避免混用(洗涤液和反应终止液除外)。
5. 充分轻微混匀对反应结果尤为重要,使用微量振荡器,如无微量振荡器,可在反应孵育前手工轻轻混匀。
6. 在试验中标准品和样本检测时建议作双孔检测。
7. 试验中所用的试管和吸头均为一次性使用,严禁在不同的液体之间混用!否则将影响试验结果。
8. 试验中请穿着试验服并带乳胶手套做好防护工作。特别是检测血液或者其他体液标本时,请按国家生物试验室安全防护条列执行。
以下是公司正在热销的产品:
BLOTTO-10核酸杂交封闭溶液Polycystin 1(Polycystic Kidney Disease 1) 多囊肾蛋白1抗原
50倍Dendhart核酸杂交封闭溶液Polycystin 2(polycystic kidney disease 2) 多囊肾蛋白2抗体
蛋白免疫杂交封闭溶液phospho-AKT1/PKB1/2/3(pThr473)peptide 酸化蛋白激酶B抗原(丝酸酸化位点:473)
通用抗原修复处理试盒RKIP(Raf kinase inhibitor protein) Raf激酶抑制蛋白抗原
物理法冰冻切片抗原修复处理试盒pre-X protein[Hepatitis B virus]N-Terminus 肝病pre-X蛋白抗原(N端)
简易化学法冰冻切片抗原修复处理试盒pre-X protein(CT)[Hepatitis B virus C-Terminus] 肝病pre-X蛋白抗原(C端)
柠檬酸化学法冰冻切片抗原修复处理试盒PHD3 (Egln3; HIF-prolyl hydroxylase 3) 脯酸羟化酶(多肽)
柠檬酸化学法冰冻组织抗原修复处理试盒ADAMTS-7(a disintegrin-like and metalloprotease-7 ) 新型金属基质蛋白酶(抗原)
PRONASE酶解法石蜡切片抗原修复处理试盒Adiponectin 脂联素(多肽片断抗原)
PEPCIN酶解法石蜡切片抗原修复处理试盒Adipo R1(adiponectin receptor 1) 脂联素受体-1(抗原)
PROTEINASE K酶解法石蜡切片抗原修复处理试盒Adipo R2(adiponectin receptor 2) 脂联素受体-2(抗原)
人糖盏蛋白elisa检测试剂盒胰蛋白酶(TRYPSIN)酶解法石蜡切片抗原修复处理试盒PSAP/PAP peptide 前列腺酸性酸酶抗原
PROTEASE酶解法石蜡切片抗原修复处理试盒PSAP/PAP peptide (human) 前列腺酸性酸酶抗原(人)
物理法石蜡切片抗原修复处理试盒P-selectin P选择素抗原
简易化学法石蜡切片抗原修复处理试盒CD63/MLA1 溶酶体膜糖蛋白抗原Bovine CD86(cluster of differentiation 86) ELISA Kit
Bovine CD86(cluster of differentiation 86) ELISA Kit英文名称大鼠白介1β (IL-1β)ELISA Kit,48T/96T 100mg
英文名称:C20orf106蛋白激酶MST2体
CCL24英文名称:CBLN4人补体片段3b受体(C3bR)免疫试盒
英文名称兔子白介1β (IL-1β)ELISA Kit,48T/96T 200mg
英文名称:C20orf107DNA结合蛋白C体 99%100TMHCs-AB
CCL15英文名称:CCM2人补体蛋白9(C9)免疫试盒
英文名称5-酰奎宁绵羊白介1β(IL-1β)ELISA Kit,48T/96T 400mg
99%50TPdG
CCL23/MIP3英文名称:CELSR2人补体蛋白5(C5)免疫试盒
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