试剂配制:
1、酶联板(Assay plate ):一块(96孔或者48孔)。
2、标准品(Standard):2瓶(冻干品)。
3、样品稀释液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素标记抗体稀释液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素标记抗体(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根过氧化物酶标记亲和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、浓洗涤液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10、终止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
人糖原合成酶激酶3英文名称:GSK-3 ELISA Kit产品别名:人GSK-3 elisa试剂盒用于测定血清,血浆及相关液体等样本。例如适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本。
产品名称 | 人糖原合成酶激酶3ELISA试剂盒 |
英文名称 | GSK-3 ELISA Kit |
货号 | CS-E3945 |
操作流程:
(1)待测样品孔中每孔加入待测样品100μl,每种样品设3个平行孔;设两个阴性对照孔,每孔加未处理组的细胞裂解液100μl;另设一个空白对照孔,加入纯细胞裂解液100μl。
(2)酶标板置4℃,包被过夜。
(3)洗板:吸干孔内反应液,用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去),之后将洗涤液注满板孔,浸泡1-2分钟,间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
(4)阴性对照孔每孔加入PBS 50μl,样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。
(5)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。
(8)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB显色液 100μl,轻轻混匀10s,置37℃暗处反应15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。
(12)分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,终测得的OD值为两者之差(W1-W2),以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
(13)数据处理:在得出标本(S)和阴性对照(N)的 OD值后,计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。
样本处理及要求:
1. 血清:将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过一夜,然后1000×g离心20 分钟,取上清即可,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
2. 血浆:用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本,并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
3. 组织匀浆:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检测。
4. 细胞培养物上清或其它生物标本:请1000×g离心20分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
以下是公司正在热销的产品:
荧光生物素稳定/稀释溶液S6PDH(NADP sorbitol-6-phosphate dehydrogenase) 6-酸山梨醇脱酶抗原
通用型HRP复合物稳定/稀释溶液S100B S100B蛋白抗原
酪胺信号扩增试盒S100B(S100 calcium binding protein B)(human, mouse, rat, bovine, Rabbit, chicken) S100B蛋白多肽
生物素标记二抗DAB显色试盒S-100A1 (S100 calcium-binding protein A1) 钙结合蛋白S100A1抗原
FITC标记二抗POD转换试盒SATB1(special AT-rich sequence binding protein) 核基质结合区结合蛋白1抗原
通用型HRP-DAB底物显色试盒SCF (Stem Cell Factor) 干细胞生长因子抗原
增强型HRP-DAB底物显色试盒SCN9A/NAV1.7(Sodium channel protein type 9 subunit alpha) 电压开启的钠离子通道SCN9A抗原
免疫组化AP-BCIP/NBT底物显色试盒CXCL14(CXC-chemokine ligand 16) CXC趋化因子14抗原
免疫印迹AP-BCIP/NBT底物显色试盒CXCL16 peptide CXC趋化因子16抗原
免疫组化AP-PNPP底物显色定量试盒Sema3A (semaphorin 3A) 臂板蛋白3A(多肽)
免疫组化HRP-TMB底物显色试盒Sema3F (semaphorin 3F) 臂板蛋白3F抗原
免疫印迹HRP-TMB底物显色试盒SFRP1(Secreted frizzled related protein 1) 分泌型卷曲相关蛋白1抗原
人糖原合成酶激酶3ELISA试剂盒超敏型HRP-TMB底物显色试盒SGLT1(sodium-glucose cotransporter1) 钠-葡萄糖共转运载体1抗原
通用型HRP-AEC底物显色试盒Shadow/SPRN(Shadow of prion protein precursor) 新朊蛋白/朊蛋白相关蛋白/沙杜(Shadoo)蛋白抗原
增强型HRP-AEC底物显色试盒Shiga-like toxin IIe variant subunit A 0139[Escherichia coli 0139] 大肠杆菌志贺样素Ⅱ型突变体(O139菌型)Bovine HCK(Tyrosine-protein kinase HCK) ELISA Kit
Bovine HCK(Tyrosine-protein kinase HCK) ELISA KitC4orf21英文名称:Phospho-BRCA1 (Ser1189)人血纤蛋白(Fibrin)免疫试盒
98%100TCEACAM16
Salmonella paratyphi a英文名称:Phospho-TSC2 (Thr1462)糖皮质激素受体抗体
CLEC4C英文名称:Phospho-BRCA1 (Ser1423)人血吸虫原免疫试盒
98%100THLA-sIgG
SRRM1英文名称:Phospho-Tuberin (Thr927)胰高血糖素样肽-1抗体
CD226英文名称:Phospho-BMX (Tyr556)人血吸虫体(IgM)免疫试盒
英文名称:Beta1-adrenergic receptor细胞周期调节蛋白P95体
SRRM2英文名称:phospho-Tau protein(Ser396)葡萄糖转运蛋白3抗体
注意事项:
1.使用前请保存在2-8℃。复溶后的标准品若未用完,请废弃。
2. 微量试剂运输中颠簸和可能的倒置,会使液体沾到管壁或瓶盖。因此使用前请1000转/分离心1分钟,以使附着管壁或瓶盖的液体沉积到管底。
3. 从冰箱中取出的浓缩洗涤液可能有结晶,属于正常现象,微加热至40℃使结晶*溶解后再配制洗涤液。
(加热温度不要超过50℃)使用时洗涤液应为室温。
4. 不同批号的试剂盒组份避免混用(洗涤液和反应终止液除外)。
5. 充分轻微混匀对反应结果尤为重要,使用微量振荡器,如无微量振荡器,可在反应孵育前手工轻轻混匀。
6. 在试验中标准品和样本检测时建议作双孔检测。
7. 试验中所用的试管和吸头均为一次性使用,严禁在不同的液体之间混用!否则将影响试验结果。
8. 试验中请穿着试验服并带乳胶手套做好防护工作。特别是检测血液或者其他体液标本时,请按国家生物试验室安全防护条列执行。
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