试剂配制:
1、酶联板(Assay plate ):一块(96孔或者48孔)。
2、标准品(Standard):2瓶(冻干品)。
3、样品稀释液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素标记抗体稀释液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素标记抗体(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根过氧化物酶标记亲和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、浓洗涤液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10、终止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
人糖磷脂酰肌醇英文名称:GPI ELISA Kit产品别名:人GPI elisa试剂盒用于测定血清,血浆及相关液体等样本。例如适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本。
产品名称 | 人糖磷脂酰肌醇ELISA试剂盒 |
英文名称 | GPI ELISA Kit |
货号 | CS-E3947 |
操作流程:
(1)待测样品孔中每孔加入待测样品100μl,每种样品设3个平行孔;设两个阴性对照孔,每孔加未处理组的细胞裂解液100μl;另设一个空白对照孔,加入纯细胞裂解液100μl。
(2)酶标板置4℃,包被过夜。
(3)洗板:吸干孔内反应液,用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去),之后将洗涤液注满板孔,浸泡1-2分钟,间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
(4)阴性对照孔每孔加入PBS 50μl,样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。
(5)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。
(8)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB显色液 100μl,轻轻混匀10s,置37℃暗处反应15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。
(12)分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,终测得的OD值为两者之差(W1-W2),以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
(13)数据处理:在得出标本(S)和阴性对照(N)的 OD值后,计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。
样本处理及要求:
1. 血清:将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过一夜,然后1000×g离心20 分钟,取上清即可,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
2. 血浆:用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本,并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
3. 组织匀浆:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检测。
4. 细胞培养物上清或其它生物标本:请1000×g离心20分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
以下是公司正在热销的产品:
淡绿(LIGHT GREEN)复染试盒SNAP-25 (synaptosomal-associated protein 25) 突触相关膜蛋白25抗原
10倍酸平衡盐(PBS)缓冲溶液Snail Snail蛋白抗原
10倍碳酸浓缩缓冲溶液Socs 3 (suppressor of cytokine signaling 3) 细胞因子信号传导抑制蛋白3抗原
10倍TBS浓缩缓冲溶液SOD1(superoxide-dimutase-1) 超氧化物歧化酶1抗原
10倍PIPES浓缩缓冲溶液SOD2 (superoxide-dimutase-2) 超氧化物歧化酶2抗原
10倍PCB浓缩缓冲溶液Somatostatin/GRIH 生长抑素抗原
10倍PCP浓缩缓冲溶液Sox2 胚胎干细胞关键蛋白
10倍Tris浓缩缓冲溶液TSFP1/SP1(transcription factor Sp1) SP1转录生长因子抗原
人糖磷脂酰肌醇ELISA试剂盒10倍PB浓缩缓冲溶液SPARC (secreted protein acidic and rich in cysteine) 富含半胱酸的酸性分泌蛋白抗原
10倍TBST浓缩缓冲清理溶液SRF(Serum response factor) 血清应答因子抗原
10倍PBST浓缩缓冲清理溶液SREBP-1(Sterol Regulatory Element Binding Protein-1) 固醇调节元件结合蛋白1抗原
10倍Tris-T浓缩缓冲清理溶液AKAP12A/SSeCKS peptide 丝酸抑制蛋白激酶C底物抗原
透射电镜(TEM)制片处理试盒Fut4/CD15/SSEA-1(Stage-specific embryonic surface antigen 1) 阶段特异性胚胎表面抗原-1抗原
透射电镜(TEM)制片处理固着液SSTR2 (somatostatin receptor 2) 生长抑素受体2抗原
透射电镜(TEM)制片处理清洗液SSTR3 peptide 生长抑素受体3抗原Bovine CCR1(C-C chemokine receptor type 1) ELISA Kit
Bovine CCR1(C-C chemokine receptor type 1) ELISA KitClaudin 20英文名称:phospho-BACH1 (Ser990)人血栓B2(TXB2)免疫试盒
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英文名称:BADH2 (Betaine-aldehyde dehydrogenase )肌球蛋白相互作用G蛋白交换因子体
STK3英文名称:TORC1绿色荧光蛋白(免疫组化用抗体)
英文名称4,5-二酰奎宁大鼠肌钙蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)ELISA Kit,48T/96T 25mg
英文名称:BGP(Bone Gla-protein)珠蛋白1体
Streptavidin英文名称:Phospho-Torc1 (Ser151)生长激素受体抗体 C2orf50英文名称:phospho-Androgen Receptor (Ser94)兔子端粒酶(TE)免疫试盒
注意事项:
1.使用前请保存在2-8℃。复溶后的标准品若未用完,请废弃。
2. 微量试剂运输中颠簸和可能的倒置,会使液体沾到管壁或瓶盖。因此使用前请1000转/分离心1分钟,以使附着管壁或瓶盖的液体沉积到管底。
3. 从冰箱中取出的浓缩洗涤液可能有结晶,属于正常现象,微加热至40℃使结晶*溶解后再配制洗涤液。
(加热温度不要超过50℃)使用时洗涤液应为室温。
4. 不同批号的试剂盒组份避免混用(洗涤液和反应终止液除外)。
5. 充分轻微混匀对反应结果尤为重要,使用微量振荡器,如无微量振荡器,可在反应孵育前手工轻轻混匀。
6. 在试验中标准品和样本检测时建议作双孔检测。
7. 试验中所用的试管和吸头均为一次性使用,严禁在不同的液体之间混用!否则将影响试验结果。
8. 试验中请穿着试验服并带乳胶手套做好防护工作。特别是检测血液或者其他体液标本时,请按国家生物试验室安全防护条列执行。
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