细胞培养的优点:
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备 记录方式可采用摄影照片、缩时电影、电视等多种手段。
5.研究的范围比较广泛应用的学科领域较为宽广,如细胞学、免疫学、肿瘤学、生物化学、遗传学、分子生物学等; 适用的对象范围广,从低等动物到高等动物,一种动物的不同年龄阶段以及不同组织,都可进行有针对性的研究。
6.研究的费用相对较经济可提供大量、同一时期、重复性好的、生物学性状相似的实验对象。
描述:(1)公司可提供新鲜或冻存细胞株;(2)细胞株数量约 5×105/瓶;(3)不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
发货:客户可根据自身科研项目的需要选择不同类型的细胞培养瓶和相应的细胞密度。发货的新鲜细胞还包含:1、发货的T25方瓶中装满50ml左右*培养基;2、说明书及注意事项;3、公司售后服务标准。
保存和应用:客户可以根据自己的需求选择新鲜或者冻存的原代细胞,如是新鲜细胞株,客户收到细胞后应立即将其放入CO2细胞培养箱内静置后2-3h,再进行后续的实验操作。如是冻存细胞,客户收到细胞后应立即将其放入液氮、-80℃冰箱或立即进行复苏。该细胞只可用于科研,不得用于临床应用。
产品名称 | HELF 人胚肺成纤维细胞 |
规格 | 5×105/瓶 |
货号 | CS-X3245 |
培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备MEM培养基(MEM:GIBCO,货号11095-080),85%;北美胎牛血清(United States,GIBCO,货号16000-044),15%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1.弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3.按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4.将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。
以下是公司正在销售的相关产品:
9.375pg/ml艰难梭菌(TCD-B)核检测试盒(PCR法)fMLF
9.375pg/ml诺如病(NV)核检测试盒(RT-PCR法)For-M-L-p-iodo-Phe-OH
0.188ng/ml鹿源性成分(Deer)核检测试盒(PCR法)For-MLE-OH
18.75 pg/ml牛源性成分(Bovine)核检测试盒(PCR法)For-ML-pNA
18.75pg/ml羊源性成分(Ovine)核检测试盒(PCR法)For-MAS-OH
46.9pg/ml鸡源性成分(Chicken)核检测试盒(PCR法)For-MA -OH
0.469ng/ml鸭源性成分(Duck)核检测试盒(PCR法)For-AGSE-OH
0.191ng/ml猪源性成分(Porcine)核检测试盒(PCR法)(Glu32)-Charybdotoxin
0.938ng/ml大豆内源基因(Lectin)核检测试盒(PCR法)Charybdotoxin,ChTX
37.5pg/ml人神经营养因子3(NT-3)ELISA试盒β -Casomorphin (1-4) amide (bovine) , Morphiceptin
HELF 人胚肺成纤维细胞人白介素-5(IL-5)ELISA试盒阪崎肠杆菌显色培养基
人白介素-5(IL-5)ELISA试盒结晶紫中性红胆盐葡萄糖琼脂(VRBGA)
人白介素4(IL-4)ELISA试盒改良月桂基盐胰蛋白胨汤(MLST)
人白介素4(IL-4)ELISA试盒万古(改良月桂基盐胰蛋白胨汤冻干配套试)
人白介素3(IL-3)ELISA试盒脑—心浸萃液态培养基
人白介素3(IL-3)ELISA试盒TSA胰蛋白胨大豆琼脂培养基(大豆消化酪素琼脂培养基)
人白介素2可溶性受体β链(IL-2sRβ )ELISA试盒缓冲蛋白胨水(缓冲胨水增菌液) (BPW)
人白介素2可溶性受体β链(IL-2sRβ )ELISA试盒结晶紫中性红胆盐葡萄糖琼脂(VRBGA)
人白介素2可溶性受体α链(IL-2sRα/CD25)ELISA试盒改良月桂基盐胰蛋白月示汤(MLST)
人白介素2可溶性受体α链(IL-2sRα/CD25)ELISA试盒肠道菌增菌汤(E E)
细胞分类:
一种:
是冻存产品,由氮直液接拿出,干冰运输给客户。一般不推荐这种,也较少使用这种方式,因为复苏手法对于细胞状态影响较大,一旦细胞状态不好,很难说是细胞自身不行,还是复苏没操作好;另外温度对细胞、基因功能状态影响很大,也不是细胞储存的方式,快递时间也很难控制,多种因素影响产品的质量;干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种:
是我们复苏好细胞,QC通过后,T-25灌满培养基常温运输给客户,排除复苏造成影响,常温运输也对细胞影响也不大,只需加25元运费(顺丰)。
质量保证:我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,进口来源,保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。
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