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定量PCR检测试剂盒

  • 更新时间:  2020-07-30
  • 产品型号:  50T
  • 简单描述
  • 定量PCR检测试剂盒 是即用型PCR试剂盒的改良产品, 含有Taq DNA 聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液、PCR 增强剂、上样染料等所有PCR 所需要的成分,用户只需加入模板和引物即可进行PCR 反应,具有广泛的用途。
详细介绍

产品名称

鳕鱼源性成分探针法荧光定量PCR检测试剂盒

英文名称

详见说明书

货号

CP934960

产品特征:

鳕鱼源性成分探针法荧光定量PCR检测试剂盒灵敏度高:能对低拷贝或多样性模板进行定量。
特异性强:采用热启动酶的激活机制,抑制非特异性扩增 。
重复性好:扩增曲线重合度高,受干扰影响少。
扩增效率高:扩增曲线Ct值低,起峰快,效率高。
原理:
所谓实时荧光定量PCR技术,是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。产品仅用于科研
检测方法:
1.Ⅰ法:
在PCR反应体系中,加入过量SYBR荧光染料,SYBR荧光染料特异性地掺入DNA双链后,发射荧光信号,而不掺入链中的SYBR染料分子不会发射任何荧光信号,从而保证荧光信号的增加与PCR产物的增加完全同步。
定量PCR扩增荧光曲线图
PCR产物熔解曲线图
2.TaqMan探针法:
探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;PCR扩增时,Taq酶的5’-3’外切酶活性将探针酶切降解,使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离,从而荧光监测系统可接收到荧光信号,即每扩增一条DNA链,就有一个荧光分子形成,实现了荧光信号的累积与PCR产物的形成完全同步。
荧光定量PCR实验步骤:
①取冻存已裂解的细胞,室温放置5分钟使其完全溶解。
②两相分离 每1ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2ml的lvfang,盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后,15到30℃孵育2到3分钟。4℃下12000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚lvfang相,中间层以及无色水相上层。RNA全部被分配于水相中。水相上层的体积大约是匀浆时加入的TRIZOL试剂的60%。
③RNA沉淀 将水相上层转移到一干净无RNA酶的离心管中。加等体积异丙醇混合以沉淀其中的RNA,混匀后15到30℃孵育10分钟后,于4℃下12000rpm 离心10分钟。此时离心前不可见的RNA沉淀将在管底部和侧壁上形成胶状沉淀块。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL试剂裂解的样品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混匀后,4℃下7000rpm离心5分钟。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室温空气中干燥5-10分钟。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA时,先加入无RNA酶的水40μl用枪反复吹打几次,使其完全溶解,获得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法测定先用稀释用的TE溶液将分光光度计调零。然后取少量RNA溶液用TE稀释(1:100)后,读取其在分光光度计260nm和280nm处的吸收值,测定RNA溶液 浓度和纯度。
以下是
鳕鱼源性成分探针法荧光定量PCR检测试剂盒的相关产品:

IL-22  白介素-22抗体高香草酸

IL-21R  白介素21受体抗体R型原人参二醇

IL-21  白介素21抗体文多灵

IL-20RB/IL-20R2  白介素20受体β链抗体长春质

IL-20R alpha/IL20RA  白介素20受体α链抗体异甘草素

IL-20  白细胞介素-20抗体川续断皂苷VI;木通皂苷D

IL-2(H2E4)  白细胞介素-2单克隆抗体芹菜素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷;大波斯菊苷

IL-2  白介素2抗体(人)辽东楤木皂苷V

IL-2  白介素2抗体(大、小鼠)辽东楤木皂苷X

IL-2  白介素2抗体辽东楤木皂苷VII

鳕鱼源性成分探针法荧光定量PCR检测试剂盒IL-2  白介素2抗体阿魏酸酯

IL1RAPL1  白介素1受体相关蛋白样1前体蛋白抗体咖因

IL-1RA  白介素-1受体拮抗抗体茶

IL-1R2 /CD121b/IL1 Receptor II  白介素1受体2抗体D十-无水葡萄糖

IL-1R1/CD121a/IL1 Receptor I  白介素1受体1抗体脱水穿心莲内酯去基因链cDNA合成预混体系Master  Premix(For  qPCR)柠檬酸酯E

RT EasyTM II(With gDNase) 柠檬

RT EasyTM II(With gDNase)牛蒡苷元

链cDNA合成预混体系Master Premix牛蒡子苷

RT EasyTM I(Premix)牛磺胆酸钠

RT EasyTM I(Premix)                             牛磺鹅去胆酸

链cDNA合成预混体系Master Premix(For qPCR)牛磺酸

RT EasyTM II(Premix) 牛磺熊去胆酸

RT EasyTM II(Premix) 牛膝甾酮

RT EasyTM II(Premix)牛血清白蛋白V

需要自备的器材:

1.仪器:分析天平、离心机、荧光 PCR 扩增仪、组织研磨器、-20 ℃冰箱、可调移液器(2 µL、20µL、200 µL、1000 µL)。
2.耗材:荧光 PCR 专用反应管、眼科剪、眼科镊、生理盐水、1.5 mL 经焦碳酸二乙酯(DEPC)水
处理的灭菌离心管、吸头(10 µL、200 µL、1000 µL)、灭菌双蒸水。
具有下列特点:
1.即开即用,用户只需要提供样品 DNA 模板,操作简单,定量准确快速。
2. 引物经过优化,特异性强。预期的 PCR 产物长度为 560 bp。
3. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。
4. 提供阳性对照,便于分析试验结果。产品仅用于科研
PCR试剂剂盒


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